Особенности построения люминесцентного микроскопа для изучения эпителио-мезенхимальной трансформации клеток in vitro
Министерство образования и науки Российской Федерации, Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2014 - 2020 годы, 14.613.21.0058
Фомичева К.А.
1, Киндеева О.В.
2,3, Петров В.А.
2,3, Иванов А.А.
2,4, Полозников А.А.
1, Алексеев Б.Я.
1, Шкурников М.Ю.
11ФГБУ "НМИЦ радиологии" Минздрава России, Москва, Россия
2НТЦ "БиоКлиникум", Москва, Россия
3Московский авиационный институт (Национальный исследовательский университет), Москва, Россия
4Центр фотохимии РАН, Москва, Россия
Email: karina-fomicheva@yandex.ru, o.kindeeva@bioclinicum.com, v.petrov@bioclinicum.com, a.ivanov@bioclinicum.com, andrey.poloznikov@gmail.com, byalekseev@mail.ru, mshkurnikov@gmail.com
Выставление онлайн: 19 июня 2018 г.
Разработан оптический люминесцентный микроскоп для наблюдения за поведением опухолевых клеток, модифицированных флуоресцентными белками GFP и RFP, и регистрации образования метастазов в биочипах. Изображения клеток в свете флуоресценции белков GFP и RFP, а также в режиме фотосъемки фиксируются в микроскопе неохлаждаемой CMOS-матрицей при возбуждении люминесценции синим и зеленым светодиодами и освещении клеток белым светодиодом соответственно. Полученные флуоресцентные изображения и фотографии в белом свете регистрируются матрицей в одной системе координат и не требуют дополнительной обработки для совмещения. Мощность облучения клеток светодиодами не превышает 50 muW/mm2 при времени экспозиции одна секунда, что на порядок ниже уровня мощности излучения, вызывающего фоторазрушение и фототоксикацию клеток при проведении длительных исследований. Введены относительные параметры оптического канала люминесцентного микроскопа, позволяющие сравнивать чувствительность системы регистрации и минимальный уровень мощности возбуждающего люминесценцию излучения для оптических элементов с различными спектральными характеристиками. -17
- Dixit R., Cyr R. // Plant J. 2003. V. 36. P. 280-290. doi 10.1046/j.1365-313X.2003.01868.x
- Schneckenburger H., Weber P., Wagner M., Bruns T., Richte V., Schickinger S., Wittig R. // Photonics \& Lasers in Medicine. 2012. V. 1. N 1. P. 35-40. doi 10.1515/plm-2011-0011
- Frigault M.M., Lacoste J., Swift J.L., Brown C.M. // J. Cell Sci. 2009. V. 122. P. 753-767. doi 10.1242/jcs.033837
- Masters B.R., Peter T.C.So. // Optics Express. 2001. V. 8. N 1. P. 2-10. doi 10.1364/OE.8.000002
- Tsai M.R., Chen S.Y., Shieh D.B., Lou P.J., Sun C.K. // Biomed. Opt. Express. 2011. V. 2. N 8. P. 2317-2328. doi 10.1364/BOE.2.002317
- Доронина-Амитонова Л.В., Федотов И.В., Федотов А.Б., Анохин К.В., Желтиков А.М. // УФН. 2015. Т. 184. N 4. С. 371-392. doi 10.3367/UFNr.0185.201504c.0371
- Pires N.M.M., Dong T., Hanke U., Hoivik N. // Sensors. 2014. V. 14. P. 15458-15479. doi 10.3390/s140815458
- Samatov T.R., Shkurnikov M.U., Tonevitskaya S.A. Tonevitsky A.G. // Progr. histochem. cytochem. 2015. V. 49. N 4. P. 21-29. doi 10.1016/j.proghi.2015.01.001
- Wiedenmann J., Oswald F., Nienhaus G.U. // Life. 2009. V. 61. P. 1029-1042. doi 10.1002/iub.256
- Chudakov D.M., Matz M.V., Lukyanov S., Lukyanov K.A. // Physiol. Rev. 2010. V. 90. P. 1103-1163. doi 10.1152/physrev.00038.2009
- [Электронный ресурс]. Режим доступа: http://www.stormoff.ru/fluorescentnaya-mikroskopiya1/
- [Электронный ресурс ]. Режим доступа: http://www.biocompare.com/pfu/10242895/soids/2254335/ /Microscopes\_and\_Cell\_Imaging\_Systems/ /Live\_Cell\_Imaging?vmpi\_6408=1
- Gautam P., Recino A., Foale R.D., Zhao J., Gan S.U., Wallberg M., Calne R., Lever A. // J. Gene Medicine. 2016. V. 18. P. 312-321. doi 10.1002/jgm.2900
- Schneckenburger H., Weber P., Wagner M., Schickinger S., Richter V., Bruns T., Strauss W.S.L., Witting R. // J. Microscopy. 2012. V. 245. P. 311-318. doi 10.1111/j.1365-2818.2011.03576.x
- Schilling Z., Frank E., Magidson V., Wason J., Lonvcarek J., Boyer K., Wen J., Khodjakov A. // J. Microsc. 2012. V. 246. P. 160-167. doi 10.1111/j.1365-2818.2012.03605.x
- [Электронный ресурс]. Режим доступа: http://evrogen.ru/protein-descriptions/TurboGFP-description.pdf
- Poloznikov A.A., Zakhariants A.A., Nikulin S.V., Smirnova N.A., Hushpulian D.M., Gaisina I.N., Tonevitsky A.G., Tishkov V.I., Gazaryan I.G. // Biochimie. 2016. V. 133. P. 74-79. doi 10.1016/j.biochi.2016.12.004
Подсчитывается количество просмотров абстрактов ("html" на диаграммах) и полных версий статей ("pdf"). Просмотры с одинаковых IP-адресов засчитываются, если происходят с интервалом не менее 2-х часов.
Дата начала обработки статистических данных - 27 января 2016 г.