Флуоресцентный микроскопический анализ жизнеспособности ооцитов млекопитающих после витрификации*
Абакушина Е.В.1, Гельм Ю.В.1, Миценык А.С.1
1ООО "Арт БиоВет", Обнинск, Калужская обл., Россия
Email: abakushina@mail.ru
Выставление онлайн: 19 апреля 2019 г.
Жизнеспособность ооцитов крупного рогатого скота и свиней после витрификации изучена при помощи флуоресцентной микроскопии. Замораживание яйцеклеток осуществлялось в средах для витрификации с разной концентрацией криопротекторов в несколько этапов с последующей витрификацией. После хранения в криобанке в течение 14 дней опытные образцы были разморожены и проведен анализ жизнеспособности ооцитов с помощью морфологической оценки ооцитов и флуоресцентной микроскопии. Для окрашивания ооцитов были использованы два специальных набора: на некроз/апоптоз клеток (Propidium iodide/Alexa Fluor 488 Annexin) и на живые/мертвые клетки (Calcein-AM/ethidium homodimer-1). Флуоресцентная микроскопия ооцитов свиней и коров показала, что для оценки жизнеспособности ооцитов следует использовать флуоресцентный краситель Calcein-AM, поскольку флуоресцентные красители Propidium iodide и ethidium homodimer-1 не отображают процесс клеточной смерти яйцеклеток. В связи с этим Propidium iodide и ethidium homodimer-1 не могут выступать индикаторами истинной гибели ооцитов. -19
- Chian R., Wang Y., Li Y. // J. Assist. Genet. 2014. V. 31. N 4. P. 411--420. doi 10.1007/s10815-014-0180-9
- Monteiroa C.A.S. // Livestock Science. 2017. V. 197. P. 1--7
- Blondin P., Vigneault C., Nivet A.L., et al. // Anim. Reprod. 2012. V. 9. N 3. P. 281--289
- Миценык А.С., Гельм Ю.В., Анохин Ю.Н., Абакушина Е.В. // Сборник тезисов 18-й Всероссийской молодежной научной конференции "Биотехнология в растениеводстве, животноводстве и ветеринарии". 19--20 апреля 2018 г. М.: ФГБНУ ВНИИСБ, 2018. С. 208--209
- Zhou G.B., Li N. // Mol. Hum. Reprod. 2009. V. 15. P. 279--285. doi 10.1093/molehr/gap016
- Somfai T., Thi Men N., Noguchi J., et al. // J. Repr. Dev. 2015. V. 61. N 6. P. 571--579. doi 10.1262/jrd.2015-089
- Ezoe K., Yabuuchi A., Tani T., et al. // PLoS One. 2015. V. 10. N 5. e0126801. doi 10.1371/journal.pone.0126801
- Punyawai K., Anakkul N., Srirattana K., et al. // J. Reprod. Dev. 2015. V. 61. N 5. P. 431--437. doi 10.1262/jrd.2014-163
Подсчитывается количество просмотров абстрактов ("html" на диаграммах) и полных версий статей ("pdf"). Просмотры с одинаковых IP-адресов засчитываются, если происходят с интервалом не менее 2-х часов.
Дата начала обработки статистических данных - 27 января 2016 г.