Вышедшие номера
Прецизионная интерферометрия как новый метод исследования конформационного состояния белка и его взаимодействия с растворителем
Переводная версия: 10.1134/S0030400X20060156
Матвеева Т.М.1, Саримов Р.М.1, Бинги В.Н.1
1Институт общей физики им. А.М. Прохорова РАН, Москва, Россия
Email: matveevata@kapella.gpi.ru, rusa@kapella.gpi.ru, vnbin@mail.ru
Выставление онлайн: 3 апреля 2020 г.

Разработан новый метод исследования конформационного состояния белка и его взаимодействия с растворителем. Метод основан на измерении показателя преломления белкового раствора с помощью прецизионного лазерного интерферометра с погрешностью 10-7. Произведена калибровка интерферометра на основе известных зависимостей изменения показателя преломления при изменении температуры воды и изменения показателя преломления раствора NaCl при изменении концентрации. С помощью интерферометра впервые зафиксированы изменения в показателе преломления в ходе процессов протеолиза (увеличение на 9·10-6 и 2.4·10-6 показателя преломления растворов бычьего сывороточного альбумина и яичного лизоцима при гидролизе, катализируемом пепсином) и денатурации (увеличение показателя преломления на 4.5·10-5 в ходе реакции яичного лизоцима с гуанидин гидрохлоридом и дитиотреитолом). На основе прямых интерферометрических измерений опровергнуто широко распространенное предположение, что показатель преломления белковых растворов определяется только концентрацией белка и его аминокислотным составом и не зависит от состояния фрагментации белка. Повышенная точность интерферометра позволяет изучать инкремент показателя преломления (dn/dc) при низких концентрациях растворенных соединений (<<1%), а также исследовать процессы, приводящие к изменениям конформации макромолекул в растворе. Ключевые слова: лазерная интерферометрия, оптические методы в биохимии, ферментативный протеолиз, денатурация, гидратные оболочки белков.